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肝素及低分子量肝素是一類有著悠久歷史的糖類藥物，同時也是目前臨床上依然廣泛應用的重要抗凝藥物，其抗凝活性與其分子量分布、寡糖組成、硫酸化位點、硫酸化程度等結構相關。然而，其結構分析的難度一直是該領域的難點，在此之前的肝素及低分子量肝素完整的結構序列分析方法均有局限，這極大地限制了我們對該產品更深入的了解和應用。

Glycomapping軟件應用于低分子量肝素糖譜分析示意圖

本論文中提到的“Glycomapping”為張真慶課題組開發具有自主知識產權的軟件，該工作首先利用超高效分子排阻色譜（UPSEC）對以低分子量肝素為代表的糖類藥物進行分離；在此基礎上利用“Glycomapping”軟件并結合HPSEC色譜行為穩定、可預測的特點，通過重復迭代擬合，重構多重峰的分離色譜圖，使未分離峰、肩膀峰以及隱藏峰全部達到基線分離效果；最后“Glycomapping”軟件基于“從頭預測”策略構建的肝素多糖、寡糖理論數據庫，利用擬合后不同聚合度寡糖組分的準確色譜保留時間對質譜實驗數據與理論數據庫的匹配進行限制，識別矯正并去除假陽性質譜信號，完成質譜數據的正確歸屬。

“Glycomapping”軟件基于超高效液相-質譜聯用技術，可自動化進行糖譜分析，實現了低分子量肝素的全組分分離與定性定量分析。該軟件成功實現了依諾肝素鈉、那屈肝素鈣、達肝素鈉等系列低分子量肝素的糖譜分析；并成功應用于不同來源、不同生產工藝的依諾肝素鈉樣品質量的一致性評價，為肝素、硫酸軟骨素、硫酸化巖藻聚糖等其他復雜多糖的結構解析及全組分定性定量分析提供了新的可行策略。同時，該軟件為復雜多糖的自動結構分析提供了可行策略，具有巨大的商業化價值，自動結構分析在制藥、食品等行業中的產品一致性評價上具有非常重要的意義和巨大的潛力，期待這種新的結構分析技術的應用和推廣，大幅提高產品一致性評價的效率和準確性，為更多新產品的開發提供結構分析的技術支持。

相關論文發表在Analytical Chemistry上，蘇州大學碩士研究生閆娜為文章的第一作者，張真慶教授和易琳助理研究員為共同通訊作者。

作者：Na Yan（閆娜）, Feifan Song（宋非凡）, Yilan Ouyang（歐陽藝蘭）, Duxin Li（李篤信）, He Tian（田禾）, Lin Yi*（易琳）, Robert J. Linhardt, Zhenqing Zhang* （張真慶）

第一作者信息：

閆娜，蘇州大學藥學院2019級碩士研究生。2019年本科畢業于蘇州大學藥學院中藥學系。曾榮獲蘇州大學校級優秀研究生、蘇州大學“協鑫獎”獎學金、蘇州大學“和合”獎學金、2017 至 2018 學年度國家獎學金、蘇州大學學業獎學金特等獎、百拓&安捷倫杯”生物醫藥色譜分析技術全國公開挑戰賽優勝獎、蘇州大學優秀畢業生等。參與發表SCI論文6篇，其中以第一作者在Analytical Chemistry、Food Chemistry發表SCI論文兩篇；申請專利6項，授權5項。

通訊作者信息：

張真慶，蘇州大學特聘教授，博士研究生導師。獲江蘇省特聘教授、江蘇省特聘教授、江蘇省雙創人才、江蘇省六大高峰人才等榮譽，現任CDE糖類藥品評審專家，擔任中國藥學會藥分委員會專家委員等多項職務。他從事糖類藥物研究逾20年，在糖類藥物的分析方法學、質量控制、結構解析、活性研究等領域取得豐碩成果。先后發表SCI論文近百篇，包括Nature Biotech、JACS、PNAS、Anal. Chem等領域頂級期刊；申請專利逾50項，授權專利近20項；協助逾十家企業完成了多個品種肝素類藥物的一致性研究；領銜GV-971結構、工藝、質量、體內藥動學等研究助力GV-971的上市。

主要研究方向：肝素類藥物糖組學研究、糖藥物結構及質量控制、糖藥物與免疫、神經退行性疾病等構效關系研究。

主頁鏈接：http://pharm.suda.edu.cn/93/a3/c28908a496547/page.htm

易琳，蘇州大學助理研究員。2014年畢業于蘇州大學藥學院，獲學士學位；2020年畢業于蘇州大學藥學院，獲藥物分析學博士學位；期間2018年至2020年獲留學基金委國家公派項目資助，赴美國北卡羅萊納大學教堂山分校藥學院聯合培養；2020年9月進入蘇州大學藥學院工作。主持國家自然科學基金、江蘇省“雙創博士”、依諾肝素鈉序列分析及與PF4相互作用研究（橫向）等項目；以第一作者和通訊作者在Analytical chemistry、Carbohydrate Polymers,、Journal of Chromatography A、Journal of the American Society for Mass Spectrometry等本領域權威期刊發表SCI論文逾20篇；申請專利10項、授權專利7項。主要研究方向：糖胺聚糖結構與活性研究、天然多糖序列結構解析及免疫調節的構效關系研究。

出版信息：

Anal. Chem. 2022,94, 38, 13000 

Publication Date: September 14, 2022

https://doi.org/10.1021/acs.analchem.2c01579

Copyright ? 2022 American Chemical Society